Spin -søjlekromatografi
2.Chromatographic Column (rotationstype)
3.Chromatographic Column (Manual)
*** Prisliste for hele ovenfor, spørg os om at få
Beskrivelse
Tekniske parametre
Spin -søjlekromatografi,Kendt som centrifugalsøjlekromatografi på kinesisk er en vigtig separationsteknik inden for biokemi og molekylærbiologi. Teknikken involverer at placere en lille kromatografisøjle i et centrifugerør og anvende centrifugalkraft i stedet for traditionel tyngdekraft for at opnå hurtig kromatografi af små mængder prøver. Centrifugalsøjlekromatografi anvendes ofte til applikationer såsom gelfiltreringsafsaltning og adsorptionskromatografi og er især egnet til håndtering af mikro-volumenprøver.
Parameter
I centrifugalsøjlekromatografi adskilles prøveblandingen med centrifugalkraft gennem en stationær fase og en mobil fase i kromatografikolonnen. Den stationære fase er normalt sammensat af adsorbenter såsom silicagel og aluminiumoxid, mens den mobile fase er et flydende opløsningsmiddel. Afhængig af partitionskoefficienterne for komponenterne i prøven mellem den stationære fase og den mobile fase, varieres bevægelsens bevægelseshastighed i kolonnen, hvilket realiserer adskillelsen af komponenterne.
Centrifugalsøjlekromatografi er vidt anvendt i biokemi og molekylærbiologi på grund af dens lette drift, hurtig adskillelseshastighed og lavt prøveforbrug. Ved at vælge passende stationære og mobile faser og optimere centrifugeringsbetingelser kan centrifugalsøjlekromatografi effektivt adskille og rense målforbindelser, hvilket giver prøver af høj kvalitet til efterfølgende biokemiske analyser og eksperimenter.
Biokemi og molekylærbiologi
Nukleinsyreekstraktion og oprensning:
DNA -ekstraktion: Effektiv ekstraktion af genomisk DNA af høj kvalitet fra biologiske prøver, såsom celler, væv og blod.
RNA -ekstraktion: ekstraktion af total RNA eller specifikke typer RNA, såsom mRNA.
Plasmid -DNA -oprensning: Renser plasmid -DNA fra bakteriekulturer.
PCR -produktoprydning: Fjern urenheder såsom primere, nukleotider og enzymer fra PCR -produkter.
Protein og peptidoprensning:
Ved anvendelse af centrifugalsøjlekromatografi kan adskillelse og oprensning af proteiner opnås i henhold til deres fysisk -kemiske egenskaber, såsom størrelse, ladning og hydrofilicitet.
Det er især velegnet til oprensning af sporproteiner, såsom ekstraktion af målproteiner fra komplekse biologiske prøver.
Fjernelse af små molekyler og kulhydrater:
Under prøveforberedelse er det ofte nødvendigt at fjerne små molekyle urenheder og kulhydrater for at forbedre renheden og kvaliteten af prøven. Centrifugalsøjlekromatografi kan effektivt nå dette mål.
Forbehandling af flydende massespektrometri:
I flydende massespektrometri -analyse er renheden og koncentrationen af prøven kritisk for de analytiske resultater. Centrifugalsøjlekromatografi kan anvendes til oprensning eller forbehandling af små volumener af prøver (f.eks. 10 ul til 150 ul) til flydende massespektrometri for at forbedre renheden af prøven og nøjagtigheden af de analytiske resultater.
Andre applikationer:
Centrifugalsøjlekromatografi kan også anvendes i eksperimentelle scenarier, såsom radiolabel -fjernelse, nick -oversættelse, affinitetsseparation, afsaltning og bufferudskiftning.
Derudover er centrifugalsøjlekromatografi blevet vidt brugt i bioteknologisektoren til ekstraktion og oprensning af biologisk aktive ingredienser i udviklingen og produktionen af biofarmaceutiske stoffer på grund af dens lette drift, hurtig adskillelseshastighed og lavt prøveforbrug.
Forklaring af oprensningsprocessen og dens betydning
Spin -søjlekromatografi spiller en vigtig rolle i oprensningen af proteiner og peptider.
Oprensningsproces
Prøveforberedelse:
Først ekstraheres en blanding indeholdende målproteinet eller peptidet fra den biologiske prøve.
Prøven kan være nødt til at gennemgå nogle forbehandlingstrin, såsom fjernelse af urenheder, såsom partikler, lipider og nukleinsyrer for at forbedre oprensningseffektiviteten.
Valg og belastning af centrifugalsøjle:
Vælg en passende centrifugalsøjle baseret på de fysisk -kemiske egenskaber af målproteinet eller peptidet. Stationære faser for centrifugalsøjler kan omfatte geler med forskellige porestørrelser, affinitet ligander eller andre typer adsorbenter.
Indlæs den stationære fase i centrifugeringssøjlen, og sørg for, at den er jævnt fordelt.
Prøvebelastning og centrifugering:
Indlæs den forbehandlede prøve på centrifuge -søjlen.
Centrifuger søjlen ved hjælp af en centrifuge til at udføre en centrifugeringsoperation for at passere prøven gennem den stationære fase under centrifugalkraft.
Eluering og samling:
Centrifugeringskolonnen elueres ved hjælp af et passende elueringsmiddel til at eluere målproteinet eller peptidet fra den stationære fase.
Saml eluatet, der kan indeholde målproteiner eller peptider med høj renhed.
Yderligere behandling:
Om ønsket kan den indsamlede eluat blive udsat for yderligere behandling, såsom koncentration, afsaltning eller bufferudskiftning.
Betydning
Forbedret renhed:
Centrifugalsøjlekromatografi fjerner effektivt urenheder fra prøven, såsom små molekyler, andre proteiner, nukleinsyrer osv., Dermed øger renheden af målproteinet eller peptidet.
Hurtig og effektiv:
Sammenlignet med den traditionelle kromatografiteknologi har centrifugalsøjlekromatografi fordelene ved let drift og hurtig adskillelseshastighed. Det kan behandle et stort antal prøver på kort tid, hvilket er velegnet til screening og forberedelsesarbejde med høj kapacitet.
Prøvebesparelse:
Centrifugalsøjlekromatografi kræver mindre prøvevolumen og er velegnet til oprensning af sporingsprøver. Dette er især vigtigt for dyrebare biologiske prøver eller vanskelige at gennemgå proteiner og peptider.
Beskyttelse af proteinaktivitet:
Under centrifugalsøjlekromatografi kan aktiviteten af målproteinet eller peptidet beskyttes ved at vælge den relevante stationære fase og elueringsbetingelser. Dette hjælper med at bevare deres biologiske funktion og strukturel integritet.
Anvendelser inden for forskning og produktion:
Centrifugalsøjlekromatografi har en bred vifte af anvendelser inden for biokemi, molekylærbiologi, bioteknologi og andre områder. Det kan bruges ikke kun til oprensning af prøver i videnskabelige forskningseksperimenter, men også til ekstraktion og oprensning af biologisk aktive ingredienser i udviklingen og produktionen af biologiske lægemidler.
Proteinets renhed er ekstremt vigtig for biologisk forskning
I biologisk forskning blandes målproteiner normalt med en række andre proteiner og urenheder. Fjernelse af disse ikke-målkomponenter gennem oprensningsprocessen kan sikre specificiteten og nøjagtigheden af efterfølgende eksperimenter. Proteinprøver med høj renhed kan reducere interfererende faktorer i eksperimenter, hvilket gør resultaterne mere pålidelige.
Urenheder kan påvirke proteinaktivitet eller forårsage nedbrydning af protein. Oprensningsprocessen fjerner disse skadelige stoffer, hvilket resulterer i proteiner med høj biologisk aktivitet. Dette er især vigtigt for lægemiddelopdagelse og bioteknologiske anvendelser, da aktiviteten af et protein direkte bestemmer dets funktion og virkning i organismen.
I biomedicinsk forskning er det ofte nødvendigt at studere strukturen, funktionen og interaktionen mellem specifikke proteiner. Prøver med høj renhedsprotein er grundlaget for disse undersøgelser. Gennem oprensningsprocessen kan der opnås tilstrækkelige mængder og renhed af målproteiner til at imødekomme disse forskningsbehov. Dette er af stor betydning for at afsløre de reguleringsmekanismer for proteiner i organismer, sygdomme i sygdomsprocessen og så videre.
Avancerede rensningsteknikker har forbedret udbyttet og aktiviteten af proteiner og fremmer gennembrud i medicinsk forskning og industrielle anvendelser. Kontinuerlige forbedringer i oprensningsmetoder muliggør mere effektive, omkostningseffektiv og skalerbar produktion af proteiner af høj kvalitet, drivende innovation og opdagelse inden for en lang række videnskabelige områder. For eksempel i biofarmaceutisk udvikling er rensning af proteiner et kritisk trin i lægemiddeludvikling og produktion. Proteinlægemidler med høj renhed kan reducere bivirkninger og immunresponser og forbedre lægemiddelsikkerhed og effektivitet.
Foruden biomedicinsk forskning er proteinrenhed også vigtig i andre applikationsscenarier. I miljøovervågning kan for eksempel proteinbaserede biosensorer bruges til at detektere forurenende stoffer; På grund af allergiske reaktioner skal indholdet af proteiner og urenheder opfylde visse sikkerhedsstandarder i fødevare- og kosmetikindustrien på grund af risikoen for allergiske reaktioner. Disse applikationsscenarier kræver også proteinprøver med høj renhed for at sikre nøjagtighed og pålidelighed.
Sammenfattende er proteinrenhed ekstremt vigtig for biologisk forskning. Det er ikke kun relateret til eksperimenternes specificitet og nøjagtighed, men påvirker også direkte den biologiske aktivitet og den kemiske integritet af proteiner. I biologisk forskning skal oprensningsprocessen for proteiner derfor understreges for at sikre pålideligheden og videnskaben af eksperimentelle resultater.
Populære tags: Spin -søjlekromatografi, China Spin -søjlekromatografiproducenter, leverandører, fabrik
Et par af
Vagtsøjle i kromatografiNæste
VakuumsøjlekromatografiSend forespørgsel
