HPLC -søjlekromatografi
2.Chromatographic Column (rotationstype)
3.Chromatographic Column (Manual)
*** Prisliste for hele ovenfor, forhør os om at få
Beskrivelse
Tekniske parametre
HPLC -søjlekromatografi, også kendt som højtydende væskekromatografi (højtydende væskekromatografi), er en søjle -væskekromatografi med høj separationseffektivitet og er også en vigtig gren af kromatografi.
Det adskiller komponenterne i prøven i henhold til forskellen i adsorptionskraft og partitionskoefficient mellem den faste fase og den mobile fase. Under et højtryksinfusionssystem pumpes en mobil fase (normalt et enkelt opløsningsmiddel eller en blanding af opløsningsmidler med forskellige polariteter) ind i en søjle indeholdende en stationær fase. Når hver komponent i prøven passerer gennem kromatogram -kolonnen på grund af den forskellige størrelse og styrke af interaktionen med den stationære fase (såsom adsorption, distribution, udelukkelse, affinitet), er opholdstiden i den stationære fase også forskellig for at opnå adskillelse af hver komponent. De adskilte komponenter indtaster derefter detektoren til detektion og opnås således kvalitativ og kvantitativ information for hver komponent.
Parameter
Anvendelser i farmaceutisk analyse
Anvendelse af HPLC -søjlekromatografi i lægemiddelanalyse
Som en vigtig separationsanalyseteknologi har højtydende væskekromatografi (HPLC) vist et stort anvendelsespotentiale og værdi inden for farmaceutisk analyse siden dens hurtige udvikling i 1970'erne. Ved at kombinere separationsprincipperne for klassisk væskekromatografi og gaskromatografi er HPLC blevet et uundværligt værktøj i lægemiddelanalyse for dets effektive adskillelse, hurtig analyse, fremragende detektionsfølsomhed og bred vifte af anvendelser.
Grundlæggende principper og egenskaber
Den anvender samspillet mellem de faste og mobile faser til gradvist til gradvist at adskille de forskellige komponenter i blandingen. Den stationære fase kan være en fast eller en væske fastgjort til et fast stof, mens den mobile fase er en væske eller en gas. I HPLC tvinges opløsningsmidlet gennem søjlen ved høje tryk på op til hundreder af atmosfærer, hvilket forbedrer separationseffektiviteten. I henhold til den forskellige separationsmekanisme kan HPLC opdeles i normal fase HPLC, omvendt fase HPLC, ionudveksling HPLC og volumenekskludering HPLC. Hver type har sin specifikke applikationsomfang og separationsmekanisme, såsom normal fase HPLC til separate analyser baseret på polaritet og omvendt fase HPLC til at adskille sig ved hjælp af hydrofobe interaktioner.
Egenskaberne ved HPLC -søjlekromatografi afspejles hovedsageligt i følgende aspekter:
Høj adskillelseseffektivitet: HPLC muliggør effektiv adskillelse af komplekse blandinger takket være infusionspumper med højt tryk og højtydende søjler.
Høj følsomhed: Moderne detektorer, såsom ultravioletabsorptionsdetektorer, fluorescensdetektorer, massespektrometri -detektorer osv., Gør HPLC har ekstremt høj detektionsfølsomhed.
Bred række anvendelser: HPLC er ikke begrænset af volatiliteten og termisk stabilitet af prøven og kan analysere termiske ustabile fysiologiske aktive stoffer med højt kogepunkt og ikke let at fordampe.
Høj grad af automatisering: De fleste moderne HPLC -instrumenter er udstyret med automatisk sampler og dataprocessor, som kan realisere automatiseringen af analyse og hurtig databehandling.
 |
 |
 |
 |
Specifik anvendelse i lægemiddelanalyse
HPLC kan bruges til lægemiddelkompositionsanalyse til at bestemme de aktive ingredienser og skadelige urenheder af medikamenter. F.eks. Gennem analysen af flavonoider, alkaloider og andre aktive ingredienser i kinesiske medicinske materialer kan typerne og indholdet af aktive ingredienser bestemmes for at sikre kvaliteten og effektiviteten af medikamenter. Derudover kan HPLC også bruges til lægemiddelkompositionsanalyse i vestlige farmaceutiske doseringsformer, såsom injektioner, tabletter, kapsler osv. For at sikre, at lægemiddelsammensætningen i lægemidlet opfylder de specificerede krav.
HPLC spiller en vigtig rolle i bestemmelsen af lægemiddelkoncentration. Ved nøjagtigt at bestemme lægemiddelindholdet i et lægemiddel kan lægemidlets sikkerhed og effektivitet sikres. I analysen af antibiotiske medikamenter kan HPLC for eksempel anvendes til at bestemme det antibiotiske indhold af lægemidlet for at evaluere den antibakterielle virkning af lægemidlet. Derudover kan HPLC også bruges til at bestemme koncentrationen af medikamenter i organismer, såsom plasma, urin, væv og andre biologiske prøver, til at evaluere effektiviteten og bivirkningen af medikamenter.
HPLC spiller også en vigtig rolle i evaluering af lægemiddelkvalitet. Ved at sammenligne de analytiske data fra forskellige partier af medikamenter er det muligt at evaluere, om kvaliteten af lægemidler er stabil. Derudover kan HPLC også bruges til at undersøge effektiviteten og farmakokinetiske egenskaber ved nye lægemidler, hvilket giver videnskabeligt grundlag for udvikling og markedsføring af nye lægemidler. For eksempel kan absorptionen, fordelingen, metabolismen og udskillelsen af nye lægemidler hos dyr bestemmes ved HPLC for at forstå effektiviteten og farmakokinetiske egenskaber ved nye lægemidler i dyrene med ny lægemiddeludvikling.
Chirale lægemidler henviser til medikamentmolekyler med chirale centre, og deres enantiomerer kan variere markant in vivo -aktivitet, stofskifte og toksicitet. Derfor er det af stor betydning at isolere og bestemme enantiomerer af chirale lægemidler. Denne kromatografi spiller en vigtig rolle i chiral lægemiddelanalyse. Ved at introducere chiral stationær fase eller chiral mobil fase -tilsætningsstof kan chirale medikamenter enantiomerer adskilles og bestemmes effektivt. F.eks. For optisk aktive aminosyremediciner kan forskellige enantiomerer adskilles og bestemmes af denne kromatografi for at evaluere den biologiske aktivitet og toksicitet af lægemidlet.
Naturlige lægemidler kommer fra en lang række kilder med komplekse sammensætninger og kan indeholde en række bioaktive forbindelser. Kolonnekromatografien spiller en vigtig rolle i analysen af naturlige lægemidler. Ved at optimere kromatografiske forhold og vælge passende mobil fase, kan effektiv adskillelse og bestemmelse af aktive komponenter i naturlige lægemidler realiseres. For eksempel blev denne kromatografimetode anvendt til at adskille sig og bestemme de aktive komponenter i kinesisk urtemedicin, såsom flavonoider og saponiner, for at forstå deres typer og indhold og til at give stærk støtte til kvalitetskontrol, udvikling og anvendelse af kinesisk urtemedicin.
Fordele og udfordringer ved HPLC -søjlekromatografi i lægemiddelanalyse
Den kromatografiske metode har fordelene ved høj separationseffektivitet, høj følsomhed, bred applikationsområde og høj grad af automatisering i lægemiddelanalyse. I praktisk anvendelse står det imidlertid også over for nogle udfordringer. For eksempel er forbehandlingen af prøven meget krævende for at sikre renheden og stabiliteten af prøven; Høje analytiske omkostninger, herunder instrument erhvervelse, vedligeholdelse, kromatografisk og mobil faseforbrug; For nogle komponenter med stærk polaritet eller stor molekylvægt kan HPLC desuden ikke være i stand til at adskille eller påvise dårligt. Derfor skal den mest passende analysemetode i praktiske anvendelser vælges i henhold til kvalitetskravene til specifikke lægemidler og den faktiske situation.
Fremtidige udsigter
Med fremskridt inden for videnskab og teknologi og udviklingen af højtydende væskekromatografiteknologi vil dens anvendelse i lægemiddelanalyse være mere bred. På den ene side vil udviklingen af nye stationære fasematerialer i høj grad udvide anvendelsesområdet for højtydende væskekromatografi og forbedre adskillelseseffektiviteten og selektiviteten. På den anden side vil HPLC -instrumenter være mere intelligente og automatiserede, overvågning af søjlestatus i realtid gennem integrerede sensorer, muliggøre forudsigelig vedligeholdelse, reducere nedetid og optimere eksperimentelle processer. Derudover kan systemet kombineret med big data -analyse -teknologi automatisk justere driftsparametre, så de matcher de bedste adskillelsesbetingelser for forskellige prøver, hvilket forbedrer resultaterne eksperimentelle effektivitet og pålidelighed. Disse fremskridt vil give mere effektive, nøjagtige og pålidelige analytiske værktøjer til lægemiddelanalyse, hvilket driver udviklingen af lægemiddelopdagelse og kvalitetskontrol.
Sammenfattende spiller denne form for kromatografi en vigtig rolle i lægemiddelanalyse og har brede applikationsudsigter. Ved kontinuerligt at optimere kromatografiske forhold, vælge passende mobile og stationære faser, introducere nye detektionsteknologier og -udstyr, forbedre dens nøjagtighed og pålidelighed i lægemiddelanalyse og give mere kraftfuld støtte til lægemiddeludvikling, kvalitetskontrol og klinisk stofbrug.
Fortjener og nedrivninger
Fordel
Effektiv adskillelse
HPLC -søjlekromatografi bruger højtryksinfusionspumpe og stationær fase med høj effektivitet, hvilket gør søjleeffektiviteten meget højere end klassisk væskekromatografi og kan realisere effektiv adskillelse af komplekse blandinger.
Høj følsomhed
Udstyret med høje følsomhedsdetektorer, såsom ultraviolette detektorer, fluorescensdetektorer osv., Kan detektere lave koncentrationer af prøver, hvilket er især vigtigt for sporanalyse.
Vidt brugt
Det er ikke begrænset af volatiliteten og den termiske stabilitet af prøven og kan analysere det organiske stof med højt kogepunkt, dårlig termisk stabilitet og stor relativ molekylmasse og har en lang række anvendelser.
Godt valg
Der er mange slags mobilfase, og selektiviteten af adskillelse kan forbedres ved at ændre typen og sammensætningen af mobil fase for at imødekomme de analytiske krav i forskellige prøver.
Høj grad af automatisering
De fleste moderne HPLC -instrumenter er udstyret med automatisk sampler og dataprocessor, som kan realisere automatiseringen af analysen og forbedre effektiviteten af analysen.
Prøveinddrivelse er let
Prøven ødelægges ikke efter at have passeret gennem søjlen, og en enkelt komponent kan opsamles eller fremstilles, hvilket er praktisk til efterfølgende eksperimenter eller applikationer.
Mangel
Prisen og daglige vedligeholdelsesomkostningerne ved væskekromatografier er høje, herunder kolonneklasse, mobilfaseforbrug og regelmæssig kalibrering af instrumentet.
Selvom det er hurtigere end klassisk væskekromatografi, er HPLC -analysetider stadig relativt lange sammenlignet med gaskromatografi, især til adskillelse og analyse af komplekse prøver.
Selvom HPLC -instrumenter er meget automatiserede, kræver driften og vedligeholdelsen af instrumenterne stadig et vist niveau af ekspertise og erfaring. Derudover kan forbehandlingen af prøver være kompliceret.
På grund af den irreversible adsorption af nogle forbindelser i den stationære fase, kan disse forbindelser muligvis ikke detekteres effektivt, hvilket påvirker nøjagtigheden af analysen.
LC -adskillelse er ofte stærkt påvirket af søjletemperatur, og konsistente temperaturforhold skal opretholdes for at opnå gentagne resultater, hvilket øger kompleksiteten og omkostningerne ved eksperimentet.
Forholdsregler i bestemmelsen af lægemiddelindhold
 |
 |
 |
Denne metode har mange forholdsregler for bestemmelse af lægemiddelindhold, hvilket er meget vigtigt for at sikre nøjagtigheden og pålideligheden af bestemmelsesresultaterne. Her er nogle vigtige overvejelser:
Forskellen i søjlen vil påvirke lægemidlets tilbageholdelsesadfærd, selvom søjlelængden, den indre diameter, partikelstørrelse på den samme søjle på grund af de forskellige egenskaber af fyldstoffet, kan fastholdelsestiden og den maksimale type af lægemidlet være meget anderledes. Derfor skal den relevante kolonne vælges i henhold til lægemiddelets egenskaber og separationsbehovet.
Søjlen skal opretholdes regelmæssigt for at undgå forurening og blokering for at sikre dens gode separationsydelse.
Buffer salt -pH i den mobile fase har en betydelig effekt på lægemidlets tilbageholdelsesadfærd og kan endda ændre den toppende rækkefølge for nogle lægemidler. Derfor, når man optimerer den mobile fase, skal der lægges særlig vægt på pH -værdien af puffersalt.
Sammensætningen af den mobile fase påvirker også lægemidlets adskillelseseffekt. For eksempel ved bestemmelse af multivitaminpræparater vil ændringer i det relative forhold mellem natriumhexanesulfonat og natriumheptan -sulfonat i den mobile fase påvirke retentionstiden og den maksimale form af hver komponent. Derfor skal den relevante mobilfasesammensætning vælges i henhold til arten af lægemidlet og de analytiske behov.
Prøvehåndteringsprocessen skal sikre repræsentativiteten og stabiliteten af prøven for at undgå nedbrydning eller kontaminering af prøven under behandlingen.
Når man vejer prøven, skal additivmetoden bruges til at veje den på plads på én gang for at sikre, at vejenes nøjagtighed. På samme tid skal vejningsoperationen standardiseres for at undgå lækage.
Kvaliteten af referencestoffet har en direkte indflydelse på resultatet af indholdsbestemmelse. Derfor skal kvaliteten af pålideligt, nøjagtigt indhold vælges.
Kontrolprodukter skal opbevares efter behov for at undgå nedbrydning eller forurening. Hvis kontrolproduktet opbevares i køleskabet, skal det opvarmes i tørreovnen inden vejning.
Den passende detektortype skal vælges i henhold til arten af lægemidlet og analytiske behov, såsom ultraviolet detektor, fluorescensdetektor osv.
Detektoren skal kalibreres med jævne mellemrum for at sikre nøjagtigheden af dens måleresultater.
Rimelig statistisk analyse af måledataene for at sikre pålideligheden og gentageligheden af resultaterne. F.eks. Kan den relative standardafvigelse (RSD) for topområdet beregnes for at evaluere præcisionen af måleresultaterne.
Ved beregning af indhold skal pålidelige metoder såsom eksterne eller interne standarder anvendes, og lineariteten af standardkurven skal sikres.
Ved etablering af en ny indholdsbestemmelsesmetode skal metodologisk verifikation udføres, herunder specificitet, linearitet, rækkevidde, præcision, nøjagtighed, holdbarhed og så videre.
Metodologisk verifikation er et vigtigt middel til at sikre, at målemetoden er videnskabelig, rimelig og pålidelig.
Sørg for, at instrumentet forbliver stabilt under analyseprocessen, især når du udfører multi-pin-analyse, skal du være opmærksom på at observere, om instrumentets responsværdi og topform er stabil.
Hvis der opstår unormale data under analyseprocessen, skal de kontrolleres og fjernes om nødvendigt om nødvendigt.
Populære tags: HPLC -søjlekromatografi, Kina HPLC -søjlekromatografiproducenter, leverandører, fabrik
Et par af
Industriel kromatografisøjleSend forespørgsel
